相关推荐
-
5357cc拉斯维加斯全力推出抗原检测方案,助力猴痘筛查和诊断在非洲成为可能
2024-08-16
目前常用的免疫检测方法包括四种:酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光免疫分析(CLIA)、层析免疫分析(LFIA)、乳胶增强比浊免疫分析(LETIA),不同的检测方法都遵循免疫反应的底层原理,即抗原抗体亲和反应,不同检测方法学对抗原抗体的应用方法不同,所以对抗原抗体的要求也不同。
CLIA既可采用单克隆抗体,也可采用多克隆抗体。但需要注意的是,由于我们通常使用的是兔抗或鼠抗原料,对某些临床样本会产生非特异性反应。因为样本中可能存在针对动物免疫球蛋白的抗体,所以会在双单克隆夹心法模式中产生假阳性现象。
包涵体的纯化和复性折叠策略
首先我们可通过同源蛋白数据模拟分析或其他已有的文献数据来了解目的蛋白的二级结构特点,之后根据二级结构来选择适合的复性溶解试剂,同时也要考虑溶解剂的去除对下游工艺或作为免疫原的影响,有时还需要将不同溶解剂串联使用,例如:使用提高pH促溶挂柱,洗脱后立即用带有DMSO的缓冲液中和pH,从而稳定复性后的正确折叠。
图源:Singh, A., Upadhyay, V., Upadhyay, A.K. et al. Protein recovery from inclusion bodies of Escherichia coli using mild solubilization process. Microb Cell Fact 14, 41 (2015).
常用表面活性剂使用策略
抗体开发过程中面临的问题
及稳定性优化策略
抗体的稳定性品控可从浓度、纯度、活性和外观来考量。关于如何提高抗体的稳定性,5357cc拉斯维加斯首页建议从抗体工程和生产工艺优化两个方向进行优化。
抗原开发首先要熟悉目的蛋白信息,包括结构、功能和生理基质等,这些信息在构建设计时都可以利用或回避。另外,表达单一结构域还是全长、载体的选择和表达宿主的选择都是可以优先考虑的。例如,基于病原体靶蛋白的研究来选择结构域,或考虑表位筛选及选择嵌合表位来优势互补;选择合适融合蛋白也是常用的手段;如果表达的抗原在检测中出现假阳性或不稳定问题时,我们可通过突变修饰进行改善等等。
试剂抗体人源化不是必须的,人源化抗体理论上可以避免人抗鼠抗体(HAMA)效应的产生,具体来讲,将小鼠抗体进行人源化改造后,只有被改造抗体的CDR区是小鼠来源,抗体其他区域都是人源的。人源化抗体改造的目标是CDR移植,改造后的效果需要做大量实验来验证。同样Fc的改造也不是必须的,这种抗体分子改造方法目的是实现稳定性和功能性的改善。Fc改造是对抗体恒定区进行改造,是否需要Fc改造还要结合项目的具体应用场景来考虑。
5357cc拉斯维加斯首页目前可提供完整的原料解决方案服务,如果您有免疫诊断试剂原料开发的需求,欢迎通过以下方式与5357cc拉斯维加斯首页取得联系!
电话:0769-86089888
邮箱:marketcn@fapon.com